УДК 57.089.3 DOI: 10.52178/00234885_2025_2_46
ВИДОСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ И ВИТРИФИКАЦИИ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА И КРОЛИКОВ
Культивирование и витрификация эмбрионов крупного рогатого скота и кроликов
Д.В. Попов*, Г.Ю. Косовский
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт пушного звероводства и кролиководства имени В.А. Афанасьева»
Россия, 140143, Московская обл., Раменский район, пос. Родники, ул. Трудовая, д. 6.
Культивирование и витрификация эмбрионов играют ключевую роль при применении репродуктивных биотехнологий в животноводстве. Для выявления видоспецифичных особенностей культивирования и витрификации эмбрионов проведены исследования на эмбрионах крупного рогатого скота и кроликов. Культивирование эмбрионов кроликов проводили в CO инкубаторе при температуре 38,5°С, 7% CO с использованием сред ТСМ 199 и DMEM F12, и IVP-эмбрионов крупного рогатого скота в среде mSOF со свежеприготовленной основой и на основе маточного раствора без бикарбоната натрия, хранившегося в течение 1 года при 40С. Выполнены исследования по витрификации IVP-эмбрионов крупного рогатого скота без блестящей оболочки в триацетатцеллюлозном полом волокне, а также по витрификации эмбрионов кроликов по двум протоколам, отличающимся режимами экспозиции и составом базовых растворов: 1) TLP-HEPES + 20% сыворотки крови (TH20) и 2) DPBS + 0,2% БСА. При культивировании эмбрионов кроликов в течение 120 часов в среде DMEM F12 развитие продолжали 68% эмбрионов, а в среде ТСМ 199 за этот период развились лишь 44,4% поставленных на культивирование эмбрионов. При культивировании 93 эмбрионов коров в среде mSOF с основой, хранившейся в течение 1 года, из блестящей оболочки вышло 25 эмбрионов, в среде mSOF со свежеприготовленной основой на культивирование было поставлено 172 эмбриона, 60 из них вышли из блестящей оболочки. Выживаемость эмбрионов кроликов после процедуры витрификации и отогревания составила: для протокола № 1 – морулы in vitro – 53%, морулы in vivo – 47,8%; для протокола № 2 – морулы in vitro – 84,6%, морулы in vivo – 68,0%. К повышению уровня выживания эмбрионов крупного рогатого скота до 93,8% приводило снижение концентрации сахарозы в растворе отогревания до 0,5М, в растворе разбавления – до 0,25М. Таким образом, изучение видоспецифичных особенностей при использовании репродуктивных биотехнологий повышает эффективность их применения в животноводстве.
Ключевые слова: кролики, крупный рогатый скот, эмбрионы, культивирование, витрификация.
Финансирование: поддержано Минобрнауки России в рамках государственного задания.
SPECIES-SPECIFIC FEATURES OF CULTURING AND VITRIFICATION OF BOVINE AND RABBITS EMBRYOS
Cultivation and vitrification of bovine and rabbit embryos
D.V. Popov*, G.Yu. Kosovsky
Federal State Budget Scientific Institute «Scientific Research Institute of Fur – Bearing Animal Breeding and Rabbit Breeding named after V.A. Afanas`ev»
Russia, 140143, 6, ul. Trudovaya, pos. Rodniki, Ramenskii r-n, Moskovskaya oblast
In animal breeding, reproductive biotechnologies such as vitrification and embryo culturing are essential. To find species-specific characteristics of embryo cultivation and vitrification, we studied embryos from cattle and rabbits. Bovine IVP embryos were cultivated in mSOF with freshly made base and on the basis of mother liquor without sodium bicarbonate stored for 1 year at 4°C, while rabbit embryos were cultivated in a CO₂ incubator at 38.5°C, 7% CO₂, using TCM 199 and DMEM F12 media. Using two protocols that varied in exposure modes and base solution composition (1) DPBS + 0.2% BSA and 2) TLP-HEPES + 20% blood serum (TH20)), we conducted investigations on the vitrification of rabbit embryos and bovine zona-free IVP embryos in triacetate hollow fiber. Only 44.5% of rabbit embryos produced in THM 199 continued to develop over the course of 120 hours, compared to 68% of embryos cultured in DMEM F12. After 93 bovine embryos were cultured in mSOF medium with the base preserved for 1 year, 25 embryos released from the pellucid zone, while when 172 embryos were cultivated in mSOF with a freshly created base, 60 of them released from the pellucid zone. The survival rate of rabbit embryos after vitrification and warming procedures was, for protocol #1, morulae in vitro, 53%, and morulae in vivo, 47.8%; for protocol #2, morulae in vitro, 84.6%, and morulae in vivo, 68.0%. Reducing the sucrose concentration in the warming solution to 0.5M and in the dilution solution to 0.25M resulted in a 93.8% improvement in the survival rate of bovine embryos. Therefore, research into species-specific reproductive biotechnologies improves the effectiveness of their use in animal husbandry.
Keywords: rabbits, cattle, embryos, culturing, vitrification.
Funding: supported by the Ministry of Education and Science of Russia under the state assignment.
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.